الفرق بين استنساخ الجينات و ير | استنساخ الجينات مقابل ير
فارق الاختلاف - استنساخ الجينات مقابل ير
ويسمى تخليق العديد من نسخ الحمض النووي من جزء معين من الحمض النووي دنا التضخيم. هناك نوعان من عمليات تضخيم الحمض النووي الرئيسية وهي استنساخ الجينات و ير. والفرق الرئيسي بين استنساخ الجينات و ير هو، الاستنساخ الجيني ينتج نسخ متعددة من جين معين في الجسم الحي من خلال بناء الحمض النووي المؤتلف وتنمو داخل بكتيريا مضيفة في حين ينتج ير الملايين من نسخ من شظايا الحمض النووي في المختبر تمر دورات متكررة من تمسخ والتوليف.
المحتويات
1. نظرة عامة والفرق الرئيسي
2. ما هو جين كلونينغ
3. ما هو ير
4. جنبا إلى جنب مقارنة - جين الاستنساخ مقابل ير
5. ملخص
ما هو الاستنساخ الجيني؟
الاستنساخ الجيني هو تقنية تستخدم لتحديد ومضاعفة جين معين من الحمض النووي الجيني المستخرج للكائن الحي من خلال بناء الحمض النووي المؤتلف. الحمض النووي الجيني يحتوي على آلاف من الجينات المختلفة المشفرة للبروتينات. عندما يتم استخراج الحمض النووي، فإنه يشمل جميع الجينات الممكنة التي يمكن أن تتحمل. وقد مكنت تقنية الاستنساخ الجيني الكشف عن جين معين من الحمض النووي الكلي. ولذلك فإن استنساخ الجينات بمثابة أداة هامة في البيولوجيا الجزيئية.
جعل مكتبة الجينومية للكائن الحي أمر ضروري في استنساخ الجينات إذا لم تكن هناك فكرة عن موقع الجين ذي الصلة في الحمض النووي. يتم إنشاء مكتبة الجينومية باستخدام الخطوات التالية.
الخطوة 1: استخراج الحمض النووي الكلي من كائن حي يحتوي على الجين المطلوب.
الخطوة 2: تقييد هضم الحمض النووي المستخرجة لإنتاج شظايا صغيرة قابلة للإدارة. يتم تسهيل هذه الخطوة عن طريق إندونوكليسيس تقييد.
الخطوة 3: اختيار ناقلات مناسبة وفتح الحمض النووي المتجه باستخدام نفس إندونوكليسيس تقييد. وتستخدم البلازميدات البكتيرية عادة كمتجهات لحمل الحمض النووي الأجنبي. البلازميدات هي دوائر صغيرة من الحمض النووي تقع داخل البكتيريا.
الخطوة 4: الجمع بين الحمض النووي المتجه والحمض النووي المجزأ لإنتاج جزيء الحمض النووي المؤتلف. وتخضع هذه الخطوة من قبل الحمض النووي ليغاز.
الخطوة 5: نقل جزيئات الحمض النووي المؤتلف في البكتيريا المضيفة. وتعرف هذه الخطوة بالتحول، ويتم ذلك باستخدام صدمة حرارية.
الخطوة 5: فحص الخلايا البكتيرية المحولة على وسط ثقافة. يتم الحصول على مجموعة مختلطة من الخلايا المضيفة المحولة وغير التحويلية في نهاية عملية التحول. كما يتضمن الجينات من الفائدة فقط في الخلايا المضيفة المحولة.وبالتالي، فمن الضروري لتحديد الخلايا المحولة. يتم الاختيار باستخدام وسائل الإعلام الانتقائية التي تحتوي على المضادات الحيوية. فقط الخلايا تتحول تنمو على هذا المتوسط الفرز تمكين الاختيار.
الخطوة 6: زراعة البكتيريا لإنتاج مكتبة الجينات. في هذه الخطوة، يتم إدخال الخلايا المضيفة المحولة في وسائل الإعلام ثقافة جديدة التي توفر متطلبات النمو الأمثل. مجموع المستعمرات على لوحات الثقافة تمثل المكتبة الجينومية لهذا الكائن الحي.
الخطوة 7: يجب فحص جزيء الحمض النووي المؤتلف الذي يحتوي على الجينات ذات الأهمية من آلاف الشظايا المستنسخة من الحمض النووي المؤتلف. ويمكن تحقيق ذلك عن طريق تحقيق تحقيقات التي تميز الجين معين أو البروتين معين النتائج من هذا الجين.
حالما يتم التعرف على الجينات المهتمة التي تحتوي على المستعمرة البكتيرية من المستعمرات الكلية، فمن الممكن جعل ملايين النسخ من البلازميد المؤتلف الذي يحتوي على الجين. يستخدم
الاستنساخ الجيني في إنشاء المكتبات الجينات، وإنتاج بروتين خاص والفيتامينات والمضادات الحيوية والهرمونات، والتسلسل ورسم خريطة الجينوم للكائنات الحية، مما يجعل نسخ متعددة من الأفراد DNA في الطب الشرعي الخ
Figure_1: جين الاستنساخ
ما هو ير؟
تفاعل البوليميراز المتسلسل (ير) هو تقنية تولد عددا كبيرا من النسخ من جزء معين من الحمض النووي. يتم الحصول على التضخيم الأسي لتسلسل الحمض النووي محددة من قبل ير تحت في المختبر الظروف. هذه التقنية هي أداة قوية جدا في البيولوجيا الجزيئية لأنها يمكن أن تتضاعف عينة صغيرة من الحمض النووي إلى كمية قابلة للاستخدام. تم إدخال ير من قبل كاري موليس في عام 1983، وهذا الاختراع الحائز على جائزة خلق تقدما كبيرا في البيولوجيا الجزيئية.
يتبع أسلوب ير تفاعلات ير المتكررة كما هو مبين في الشكل 2. يتكون تفاعل ير واحد من ثلاث خطوات رئيسية تحدث في ثلاث درجات حرارة مختلفة؛ تغيير طبيعة من ضعف الذين تقطعت بهم السبل في الحمض النووي في 94 0 C، الصلب من الاشعال في 68 0 C واستطالة حبلا في 72 0 C. لذلك، عندما يتم تنفيذ ير، ينبغي الحفاظ على درجة الحرارة تقلبا للغاية للتكرار الصحيح. ير يتم في جهاز ير داخل أنابيب ير. يتم تحميل أنابيب ير مع مخاليط ير الصحيحة التي تحتوي على الحمض النووي القالب، بوليميراز طاق، الاشعال، دنتبس والعازلة. يتم تغيير طبيعة الحمض النووي العينة الذين تقطعت بهم السبل الحمض النووي في الحمض النووي الذين تقطعت بهم السبل واحد عن طريق كسر الروابط الهيدروجين بين القواعد التكميلية في 94-98 0 C. ثم يتم عرض خيوط واحدة من الحمض النووي القالب للالاشعال. وينبغي توفير زوج من الاشعال (الأمام والعكس)، وينبغي أن تكون قابلة للحرارة لتحمل درجات حرارة عالية. الاشعال هي واحدة تسلسل الحمض النووي قصيرة الذين تقطعت بهم السبل مكملة لأهداف شظية الحمض النووي الهدف. وتستخدم الاشعال الاصطناعية في ير. الاشعال ربط مع قواعد تكميلية من الحمض النووي عينة والشروع في تركيب حبلا جديدا. يتم تحفيز هذه الخطوة من قبل انزيم يسمى البلمرة طاق. انزيم البلمرة الحمض النووي الحراري معزولة من ثيرموس أوقاتيكوس. عندما تتوفر الاشعال والنيوكليوتيدات (لبنات البناء)، البلمرة طاق يبني حبلا جديدا من الحمض النووي مكمل للحمض النووي القالب.في نهاية برنامج ير، لوحظ جزء الحمض النووي تضخيم باستخدام هلام الكهربائي. إذا كان هناك حاجة إلى مزيد من التحليل، وتنقية المنتج ير من هلام.
ير مفيد جدا لتشخيص ورصد الأمراض الوراثية والمكتسبة، وتحديد المجرمين (في مجال الطب الشرعي)، ودراسة هيكل ووظيفة شريحة مستهدفة من الحمض النووي، وتسلسل ورسم خرائط الجينوم من الكائنات الحية، وما إلى ذلك. وقد أصبح ير تقنية المختبر الروتينية في مختبرات أبحاث البيولوجيا الطبية والجزيئية بين العلماء منذ أن لديها مجموعة واسعة من التطبيقات.
figure_2: تفاعل البلمرة المتسلسل
ما هو الفرق بين استنساخ الجينات و ير؟
- ديف مقال قبل منتصف الجدول>>
الاستنساخ الجيني مقابل ير |
|
| الاستنساخ الجيني هو عملية صنع نسخ متعددة من جين معين في الجسم الحي من خلال الحمض النووي المؤتلف وتحويل إلى بكتيريا المضيف. | تقنية ير تنتج نسخ متعددة من تسلسل الحمض النووي في المختبر من خلال دورات متكررة من تفاعلات ير. |
| متطلبات بناء الحمض النووي المؤتلف | |
| يتم إنتاج الحمض النووي المؤتلف من أجل تحديد موقع الجين. | لا ينتج الحمض النووي المؤتلف. |
| الحاجة للعمل | |
| هذه العملية كثيفة العمالة. | لا حاجة إلى العمل المكثف. |
| في الجسم الحي أو في عملية المختبر | |
| بناء الحمض النووي المؤتلف في المختبر وتضخيم الحمض النووي في الجسم الحي. | تضخيم الحمض النووي يحدث تماما في المختبر. |
ملخص - استنساخ جين مقابل ير
الاستنساخ الجيني و ير هما طريقتان تستخدمان لتضخيم الحمض النووي. ير هو في المختبر العملية التي تجعل نسخ متعددة من الحمض النووي من جزء دنا معين دون استخدام الحمض النووي المؤتلف والكائن الحي المضيف. الاستنساخ الجيني هو في المقام الأول في الجسم الحي العملية التي تنتج في نسخ متعددة من الجينات المهتمة داخل الكائن المضيف عن طريق بناء الحمض النووي المؤتلف. هذا هو الفرق بين استنساخ جين و ير.
المرجع:
1. غريفيثس، أنتوني جف. "استنساخ جين معين. "التحليل الوراثي الحديث. مكتبة الولايات المتحدة الوطنية للطب، 01 يناير 1999. ويب. 22 فبراير 2017
2. "تفاعل البوليميراز المتسلسل (ير). "المركز الوطني لمعلومات التكنولوجيا الحيوية. U. S. المكتبة الوطنية للطب، n. د. على شبكة الإنترنت. 22 فبراير 2017
إيماج كورتيسي:
1. "الشكل 17 01 06" بواسطة نكس أوبنستاكس - (سيسي بي 4. 0) عبر ويكومديا كومونس
2. "ير" بواسطة مادبريم - العمل الخاص (سيسي بي-سا 3. 0) عبر ويكومديا كومونس
