الفرق بين صفحة سدز و لووت ويسترن | سدز بادج فس وسترن بلوت

Anonim

الفرق الرئيسي - سدز الصفحة مقابل لطخة الغربية

الغربية النشاف هو الأسلوب الذي يكشف بروتين معين من عينة البروتين. يتم تنفيذ هذه التقنية عن طريق عدة خطوات رئيسية: الكهربائي هلام، النشاف، والتهجين. الصوديوم دوديسيل كبريتات إس دي إس بايج (SDS صفحة) هو نوع من تقنية الكهربائي للهلام الذي يستخدم لفصل البروتينات وفقا لأحجامها (الأوزان الجزيئية). لطخة غربية ورقة خاصة من غشاء النشاف الذي يستخدم لنقل نفس النمط من البروتينات في صفحة سدز. الفرق الرئيسي بين SDS الصفحة وصمة عار الغربية هو أن SDS الصفحة يسمح للفصل البروتينات في خليط أثناء لطخة غربية تسمح الكشف النوعي والكمي لبروتين معين من خليط. كلاهما مفيد في دراسات تحليل البروتين.

المحتويات

1. نظرة عامة والفرق الرئيسي

2. ما هي صفحة سدز

3. ما هو لطخة الغربية

4. جنبا إلى جنب مقارنة - سدز الصفحة مقابل لطخة الغربية

5. ملخص

ما هي صفحة سدز؟

سدز الصفحة هي تقنية هلام الكهربائي المستخدمة لفصل البروتين. ويستخدم عادة في الكيمياء الحيوية، وعلم الوراثة، والطب الشرعي والبيولوجيا الجزيئية. مرة واحدة يتم استخراج البروتينات من العينة، يتم تشغيلها على هلام تتكون من سدز وبولي أكريلاميد. سدز هو المنظفات الأيونية التي تستخدم لخطي البروتينات (إنكارت البروتينات) ونقل شحنة سلبية للبروتينات الخطية تتناسب مع كتلة الجزيئية. بولي أكريلاميد يصبح دعم الصلبة للهلام. البروتينات تحريفها التي تهمة سالبة تهاجر نحو الطرف الإيجابي للجهاز من خلال هلام. وفقا لحجم من البروتينات، وسرعات الهجرة تختلف بين البروتينات ويحدث الانفصال. لذلك، الصفحة سدز هو مفيد لفصل البروتينات الفردية على أساس أحجامها.

إعداد هلام بولي أكريلاميد لتجزئة البروتينات هو خطوة حاسمة في صفحة سدز. تركيز الصحيح من بولكرلميد ونوع من وكيل ربط عبر تستخدم بقوة تؤثر على الخصائص الفيزيائية للهلام، مما يجعل الفصل الفعلي للبروتينات المختلفة. يجب أن تدار أحجام المسام من هلام بشكل صحيح لفصل فعال. ومع ذلك، تعتبر سدز الصفحة تقنية عالية الدقة فصل البروتين.

تقنية سدز الصفحة لها قيود كبيرة في تحليل البروتين. منذ سدز ينقص البروتينات قبل الانفصال، فإنه لا يسمح للكشف عن النشاط الأنزيمي، والتفاعلات البروتين ملزمة، العوامل المساعدة البروتين، وما إلى ذلك.

الشكل 01: صفحة سدز

ما هو "لطخة غربية"؟

تقنية النشاف الغربية تمكن من الكشف عن بروتين معين من خليط البروتين وقياس كمية والوزن الجزيئي للبروتين. لطخة غربية هو الغشاء المستخدمة أثناء إجراء النشاف للحصول على صورة مرآة من أنماط البروتين في هلام بولي أكريلاميد SDS-. الغشاء الذي يستخدم للنشاف الغربية يتكون في الغالب من النيتروسليلوز أو البولي فينيلين ديفلوريد (بفدف). الغشاء مع البروتين المنقولة يمكن استخدامها لتحديد البروتين المطلوب. فإنه يتطلب الأجسام المضادة عالية الجودة للكشف عن البروتين المطلوب عن طريق التهجين. يرتبط الجسم المضاد بمستضد معين ويكشف وجود المستضد المطلوب وهو بروتين.

يتم نقل البروتينات من هلام بولي أكريلاميد سدز إلى لطخة غربية بواسطة إليكتروبلوتينغ. وهو طريقة فعالة وسريعة التي تسبب البروتينات إلى إليكتروفوريز من هلام وتمرير على غشاء النيتروسليلوز (لطخة غربية).

الشكل 02: لطخة غربية

ما هو الفرق بين الصفحة سدز والصمة الغربية؟

- ديف المادة قبل الجدول ->

سدز الصفحة مقابل لطخة الغربية

سدز الصفحة هي تقنية هلام الكهربائي. لطخة غربية هي تقنية التي يتم تنفيذها على غشاء للكشف عن بروتين معين من خليط.
استخدام
الصفحة سدز يسمح فصل البروتينات وفقا لأحجامها. يسمح لطخة غربية نقل البروتينات على هلام الصفحة سدز دون تغيير نمطها ويسمح التهجين مع الأجسام المضادة المحددة.
العيوب
تمسخ البروتين، وارتفاع تكلفة، ووجود المواد الكيميائية العصبية هي عيوب هذه التقنية. هذه التقنية تستغرق وقتا طويلا وتتطلب وجود ظروف تحكم شخصية ومحددة ذات خبرة جيدة.

ملخص - سدز الصفحة مقابل لطخة الغربية

الصفحة سدز وطخة غربية هي طريقتين تشارك في تحليل البروتين. يسمح سدز الصفحة سهلة فصل البروتينات على هلام وفقا لوزنها الجزيئي. لطخة غربية يساعد على تأكيد وجود وكمية من البروتين معين من خلال التهجين مع الأجسام المضادة المحددة. هذا هو الفرق بين الصفحة سدز وصمة عار الغربية.

المراجع:

1. بلانشر، C.، و A. جونز. "سدز -PAGE والتقنيات الغربية النشاف. "طرق الطب الجزيئي. U. S. المكتبة الوطنية للطب، n. د. على شبكة الإنترنت. 27 مارس 2017

2. نواكوسكي، أندرو B.، ويليام J. وبيغ، وديفيد H. بيترينغ. "الأصلية سدز-بادج: عالية الدقة فصل الكهربي من البروتينات مع الاحتفاظ بالممتلكات الأصلية بما في ذلك الأيونات المعدنية ملزمة. "ميتالوميكس: علم القياسات الحيوية المتكاملة. الولايات المتحدة مكتبة الطب الوطنية، أيار / مايو 2014. ويب. 27 مارس 2017.

إيماج كورتيسي:

1. "سدز-بادج إليكترووريسيس" بقلم بنسكونت في ويكيبيديا (سيسي بي 3. 0) من خلال كومونس ويكيميديا ​​

2. "ويسترن بلوت 114A" بواسطة أمانثاباجدون - العمل الخاص (المجال العام) عبر كومونس ويكيميديا ​​