الفرق بين سيبر غرين و تقمان | سيبر الخضراء مقابل تقمان

Anonim

الفرق الرئيسي - سيبر غرين مقابل تقمان

سيبر غرين و تقمان هما طريقتان تستخدمان للكشف عن أو مشاهدة عملية التضخيم في الوقت الحقيقي ير. سيبر الأخضر هو طريقة تقوم على إقحام صبغ تلطيخ الحمض النووي في حين تقمان هي طريقة تقوم على التحلل المائي. تم تصميم كل من التكنولوجيات لتوليد مضان خلال ير، والذي يسمح في الوقت الحقيقي آلة ير لرصد رد فعل في "الوقت الحقيقي". يتم تنفيذ طريقة سيبر الخضراء باستخدام صبغة الفلورسنت يسمى سيبر الأخضر ويكشف التضخيم من خلال ربط الصبغة لإنتاج الحمض النووي المزدوج الذين تقطعت بهم السبل. ويتم تقمان باستخدام تحقيقات مزدوجة المسمى ويكشف التضخيم عن طريق تدهور التحقيق بواسطة بوليميراز طاق والإطلاقات من فلورفور. هذا هو الفرق الرئيسي بين سيبر الأخضر و تقمان.

المحتويات

1. نظرة عامة والفرق الرئيسي

2. ما هو سيبر الأخضر

3. ما هو تقمان

4. جنبا إلى جنب مقارنة - سيبر الخضراء مقابل تقمان

5. ملخص

ما هو سيبر الأخضر؟

سيبر الأخضر هو صبغة الفلورسنت المستخدمة لصمة الأحماض النووية، وخاصة الحمض النووي المزدوج تقطعت بهم السبل في البيولوجيا الجزيئية. يستخدم سيبر طريقة الأخضر لقياس المنتجات ير خلال ير في الوقت الحقيقي. بمجرد أن يربط مع الحمض النووي، فإن مجمع الحمض النووي صبغ الناتجة يمتص الضوء الأزرق وتنبعث الضوء الأخضر المكثف. يحدث ذلك بسبب التغيير الهيكلي الذي يحدث في جزيء صبغة على ملزمة مع الحمض النووي المزدوج تقطعت بهم السبل. عندما ير يخلق المزيد والمزيد من الحمض النووي، والمزيد من جزيئات صبغة ربط مع الحمض النووي، وتوليد المزيد من مضان. لذلك، يزيد مضان مع تراكم المنتج ير. وبالتالي، فإن كمية المنتج ير يمكن قياسها كميا بواسطة سيبر الأخضر مضان الكشف.

سيبر الصباغ الأخضر يمكن أن تستخدم أيضا لوضع العلامات الحمض النووي في الخلوي والمجهر الفلورسنت. وقد تم استبدال بروميد إثيديوم بنجاح من قبل سيبر الأخضر منذ بروميد إيثيديوم هو صبغة مسرطنة مع مشاكل التخلص خلال التصور الحمض النووي في الكهربائي هلام.

هناك مزايا وعيوب طريقة سيبر الخضراء. هذه الطريقة حساسة جدا وغير مكلفة وسهلة الاستخدام. ومع ذلك، نظرا لقدرته على ربط أي الحمض النووي المزدوج تقطعت بهم السبل، ملزمة غير محددة يمكن أن يؤدي إلى أكثر من الكمي من المنتج ير.

الشكل 01: تقنية سيبر الخضراء

ما هو تقمان؟

تقمان هو طريقة بديلة ل سيبر الأخضر لمراقبة الوقت الحقيقي عملية ير. وتعتمد هذه الطريقة على نشاط "إكسيوكلياز 5" - 3 "من إنزيم تاق البلمرة لتحطيم تحقيقات خلال تمديد حبلا جديدا وإطلاق فلورفور.وتستخدم تحقيقات مزدوجة المسمى في هذا الأسلوب، وأنه يقوم على التحلل من تحقيقات. تحقيقات هي فلوريسنتلي المسمى الحمض النووي أوليغونوكلأوتيدس وجود جزيء مراسل الفلورسنت (فلورفور) في نهاية 5 'وجزيء الخندق في نهاية 3'. وهي مصممة لربط قالب واحد الذين تقطعت بهم السبل في الجانب الآخر من أنيلس التمهيدي. تاق البوليميراز يضيف النيوكليوتيدات إلى التمهيدي ويمتد حبلا جديدا نحو تحقيقات مزدوجة المسمى. وبمجرد أن تجتمع بوليميراز طاق التحقيق، عمل نوكلياز من البلمرة طاق ينشط ويحط من التحقيق. مرة واحدة أنه يكمل تخليق حبلا جديدا، يتعرض التحقيق إلى تدهور كامل وإطلاق فلورفور. الافراج عن فلورفور يولد مضان. جزيء الفلورسنت كينشر بكفاءة يقضي الضوء المنبعث ويخلق الإخراج لتقدير كمنتج ير. الافراج عن فلوروفوريس وكمية من المنتجات ير هي متناسبة. وبالتالي، يمكن أن يتم القياس الكمي بسهولة عن طريق طريقة تقمان.

الشكل رقم 02: طريقة تقمان

يستخدم أسلوب تقمان في الوقت الحقيقي ير، والتقدير الكمي للتعبير الجيني، والكشف عن تعدد الأشكال الوراثية، والتحديد الكمي من الحمض النووي الكروموسومات، وتحديد البكتيريا والتحقق من تحليل ميكروأري، سنب التنميط الجيني الخ ما هو الفرق بين سيبر الأخضر و تقمان؟

- ديف المادة قبل منتصف الجدول>>

سيبر الأخضر مقابل تقمان

سيبر الأخضر على أساس دنا ملزمة صبغ.

تقمان تعتمد على تحقيقات التهجين و 5 'إلى 3' نشاط نوكلياز نوكلياز من البلمرة طاق. مجسات فلورزنتلي المسمى
لا توجد حاجة تحقيقات فلورزنتلي المسمى.
مطلوب تحقيقات مزدوجة المسمى. مولتيبلكس تحليل جين
لا يمكن استخدامه لأهداف الجينات متعددة.
ويمكن استخدامه لأهداف الجينات متعددة. التكلفة
هذا أقل تكلفة.
هذا أكثر تكلفة. خصوصية
هذا هو أقل تحديدا ويرتبط مع أي الحمض النووي المزدوج حبلا
هذه هي محددة للغاية منذ تحقيقات الكشف عن منتجات التضخيم محددة. فعالية
هذا أقل فعالية.
هذا فعال للغاية. تطبيق
يستخدم هذا في الوقت الحقيقي ير، الاغاروز هلام التصور، دنا وضع العلامات الخ
يستخدم هذا في الوقت الحقيقي ير، الكمي التعبير الجيني، الكشف عن تعدد الأشكال الوراثية، الخ سوماري - سيبر الأخضر وطقمان

طقمان و سيبر الأخضر هما طريقتين المستخدمة في الوقت الحقيقي ير (ير الكمي). كلتا الطريقتين تمكن من قياس كمية المنتج ير بشكل فعال وتعتمد على انبعاث مضان. يستخدم أسلوب تقمان تحقيقات مزدوجة المسمى للكشف عن الحمض النووي المتراكمة في حين يستخدم طريقة سيبر الأخضر صبغ الفلورسنت. كل من هذه الأساليب لديها أيضا تطبيقات مختلفة في البيولوجيا الجزيئية.

المرجع:

1. تاجديني، محمد حسن، مجتبى بانجبور، والشغايغ هاغجوي جافانمارد. "مقارنة سيبر الخضراء وطرق تقمان في الكمي في الوقت الحقيقي تحليل تفاعل سلسلة البوليميراز من أربعة أنواع فرعية مستقبلات الأدينوزين."البحوث الطبية الحيوية المتقدمة. مدكنو المنشورات والإعلام المحدودة، 2014. ويب. 13 مارس 2017.

2. "في الوقت الحقيقي ير المبادئ الأساسية. "الوقت الحقيقي ير، الكمية (قر)، الاشعال و ماستريميكس: بريمرديسين المحدودة N. p. ، n. د. على شبكة الإنترنت. 13 مارس 2017.

3. "سيبر الخضراء وغيرها من الأصباغ ير في الوقت الحقيقي. "بيوكومبار. N. p. ، 05 أبريل 2010. ويب. 14 مارس 2017

إيماج كورتيسي:

1. "ير مع سيبر الخضراء" بي -Ygonaar 23: 09، 7 مارس 2006 (أوتك) - هو رسم بياني خلق من قبل يجونار مع باور بوينت، سيسي بي-سا 3. 0، هتبس: // المشاعات. ويكيميديا. غزاله / ث / مؤشر. بى؟ curid = 619528

2. "تقمان" من قبل المستخدم: برينداماجيد - العمل الخاص (المجال العام) عبر كومونس ويكيميديا ​​