الفرق بين ير و في الوقت الحقيقي ير

ير مقابل ير في الوقت الحقيقي

ير أو تفاعل البوليميراز سلسلة هو اكتشاف ثورة في البيولوجيا الجزيئية الحديثة، الذي تم تطويره لأول مرة من قبل الكيميائي كاري موليس في عام 1983. وهو يسمح تسلسل واحد في الحمض النووي المعقدة ليتم تضخيمها للتحليل. الفكرة الأساسية من ير هو أن اثنين من الاشعال، التي هي مكملة للخيوط المعاكسة من تسلسل الحمض النووي، وتوجه نحو بعضها البعض. تنتج الاشعال خيوط تكميلية، كل منها يحتوي على التمهيدي الآخر. وبالتالي، فإن النتيجة هي كمية كبيرة من تسلسل المقابلة للحمض النووي الذي يقع بين اثنين من الاشعال. يستخدم انزيم بوليميراز الحمض النووي لتوسيع الاشعال في ير. بوليميراز الحمض النووي هو انزيم حراري، ولديه القدرة على البقاء على قيد الحياة في درجات حرارة عالية (94 إلى 95 درجة مئوية) تستخدم لتمسخ الحمض النووي القالب.

يتضمن تفاعل البوليميراز المتسلسل ثلاث خطوات، وهي جولات متكررة من التشبع، وطلاء من الاشعال، وتوليف الحمض النووي. يتم استخدام آلة ثيرمويكلر لتنفيذ هذا التفاعل بحيث يمكن برمجتها لتغيير درجات الحرارة بسرعة وبدقة. تطبيقات ير هي التحقيقات الجنائية، بصمة الحمض النووي، والكشف عن مسببات الأمراض، وتحليل الحمض النووي من الأنواع البشرية في وقت مبكر.

ما هو ير التقليدية؟

هناك ثلاث مراحل رئيسية من ير التقليدية، وهي؛ مرحلة تضخيم الحمض النووي، فصل ير، والكشف عن المنتجات. فصل شرائح الحمض النووي وعادة ما يتم عن طريق الكهربائي الاغاروز هلام. ثم تلطخ المنتجات مع بروميد إيثيدويم. وأخيرا، يتم الكشف عن طريق التصور من العصابات على المواد الهلامية تحت ضوء الأشعة فوق البنفسجية. لذلك، لا يتم التعبير عن النتائج النهائية لل ير التقليدية كأرقام. عادة ير التقليدي هو فقط قادرة على الكشف عن معلمة واحدة.

ما هو ير في الوقت الحقيقي؟

في الوقت الحقيقي ير يمكن الكشف عن التضخيم من المنتجات، كما يتم تصنيعها المنتجات. مع تطور التكنولوجيا، أصبح ير تقنية شعبية جدا، وخاصة للكشف عن وتحديد البكتيريا في الأطعمة. في الوقت الحقيقي ير يستخدم نظام صبغة الفلورسنت وثيرمويكلر مجهزة القدرة على الكشف عن الفلورسنت.

ما هو الفرق بين ير التقليدية و ير في الوقت الحقيقي؟

• ير التقليدية هو أكثر تستغرق وقتا طويلا لأنه يستخدم هلام الكهربائي لتحليل المنتجات ير تضخيمها. في المقابل، ير في الوقت الحقيقي هو أقل تستغرق وقتا طويلا لأنه يمكن الكشف عن التضخيم خلال المراحل الأولى من التفاعل.

• ير في الوقت الحقيقي بجمع البيانات في مرحلة النمو الأسي من ير بينما ير التقليدي بجمع البيانات عند نقطة النهاية من رد الفعل.

• نتائج نقطة النهاية من ير التقليدية قد لا تكون دقيقة جدا، ولكن نتائج ير في الوقت الحقيقي دقيقة جدا.

• ير في الوقت الحقيقي هو أكثر حساسية من ير التقليدي.

• ير التقليدية لديها قرار ضعيف جدا في الوقت الحقيقي ير يمكن الكشف عن تغييرات قليلة جدا بسبب ارتفاع القرار.

• الكشف عن نقطة النهاية من ير التقليدية لديها مجموعة ديناميكية قصيرة في الوقت الحقيقي الكشف ير لديها مجموعة ديناميكية واسعة.

• على عكس ير التقليدية، يتم العثور على تقنيات الكشف الآلي في الوقت الحقيقي ير.

• ير التقليدية متطورة للغاية والعمل كثيفة أكثر من الوقت الحقيقي ير.

• على عكس ير في الوقت الحقيقي، ير التقليدية لا يمكن التمييز بين البكتيريا الميتة والحية.

• ير في الوقت الحقيقي يستخدم نظام صبغة الفلورسنت للكشف عن المنتجات في حين ير التقليدي يستخدم إيثيديوم بروميد والأشعة فوق البنفسجية ضوء لتصور العصابات في وسط هلام الاغاروز.