الفرق بين الجنوبي والشمالي والغربي النشاف | سوثرن فس نورثرن فس ويسترن بلوتينج

الفرق الرئيسي - شمال مقابل جنوب مقابل الغربية النشاف

الكشف عن تسلسل معين من الحمض النووي، رنا، والبروتينات ضروري لمختلف أنواع الدراسات في البيولوجيا الجزيئية. هلام الكهربائي هو الأسلوب الذي يفصل الحمض النووي، رنا، والبروتينات وفقا لأحجامها. من ملامح هلام، يتم الكشف عن تسلسل الحمض النووي معين، تسلسل الحمض النووي الريبي، أو البروتين من قبل تقنيات خاصة تسمى النشاف والتهجين مع تحقيقات المسمى. هناك ثلاثة أنواع مختلفة طرق النشاف وهي الجنوبية والشمالية والغربية. الفرق الرئيسي بين شمال وجنوب وغرب النشاف يكمن في نوع الجزيء الذي يكشف من عينة. النشاف الجنوبي هو الأسلوب الذي يكشف تسلسل الحمض النووي محددة من عينة الحمض النووي. النشاف الشمالية هي تقنية التي تكتشف تسلسل الحمض النووي الريبي محددة من عينة الحمض النووي الريبي. النشاف الغربي هو الأسلوب الذي يكشف بروتين معين من عينة البروتين.

المحتويات

1. نظرة عامة والفرق الرئيسي

2. ما هو جنوب النشاف

3. ما هو نورثرن بلوتينغ

4. ما هو النشاف الغربية

5. جنبا إلى جنب مقارنة - شمال مقابل جنوب مقابل الغربية النشاف

6. ملخص

ما هو جنوب النشاف؟

وقد وضعت تقنية النشاف الجنوبية من قبل E. M. الجنوبية في عام 1975 لتحديد تسلسل الحمض النووي محددة من عينة الحمض النووي. هذه هي تقنية النشاف الأولى التي أدخلت في البيولوجيا الجزيئية. فقد مكنت من الكشف عن جينات محددة من الحمض النووي، شظايا محددة من الحمض النووي، وما إلى ذلك هناك عدة خطوات تشارك في تقنية النشاف الجنوبي. وهم على النحو التالي.

1. يتم عزل الحمض النووي من العينة وهضمها مع إندونوكليسيس تقييد.
2. يتم فصل العينة التي يتم هضمها بواسطة أغاروس هلام الكهربائي.
3. شظايا الحمض النووي في هلام هي التشويه والتحريف في خيوط واحدة من خلال استخدام محلول قلوي.
4. يتم نقل الحمض النووي واحد تقطعت بهم السبل إلى غشاء فلتر النيتروسليلوز عن طريق نقل الشعرية.
5. يتم إصلاح الحمض النووي المنقول على الغشاء بشكل دائم.
6. يتم تهجين الحمض النووي ثابت على الغشاء مع تحقيقات المسمى.
7. يتم غسل الحمض النووي غير المنضم من الغشاء عن طريق الغسيل.
8. يتعرض فيلم الأشعة السينية للغشاء ويتم إعداد التصوير الذاتي.

يتم تطبيق النشاف الجنوبي لجوانب مختلفة من البيولوجيا الجزيئية.ومن المفيد في رسم الخرائط رفلب، دراسات الطب الشرعي، مثيلة الحمض النووي في التعبير الجيني، الكشف عن الجينات تحور في اضطرابات وراثية، البصمات الحمض النووي، الخ

الشكل 01: تقنية النشاف الجنوبية

ما هو النشاف الشمالية؟

النشاف الشمالية هي طريقة مصممة للكشف عن تسلسل رنا معين أو تسلسل مرنا من عينة لدراسة التعبير الجيني. وقد تم تطوير هذه التقنية من قبل ألوين، كيمب، وستارك في عام 1979. وهو يختلف عن سورثرن وتقنيات النشاف الغربية بسبب عدة خطوات. ومع ذلك، يتم تنفيذ هذه التقنية أيضا عن طريق الرحلان الكهربائي، النشاف، والتهجين مع تحقيقات محددة المسمى والكشف. يتم تنفيذ تقنية النشاف الشمالية على النحو التالي.

1. يتم استخراج الحمض النووي الريبي من العينة وفصلها بالهلام الكهربائي.
2. يتم نقل الحمض النووي الريبي من الجل على غشاء النشاف وثابتة.
3. يتم التعامل مع الغشاء مع التحقيق المسمى أعدت من [كدنا] أو رنا (التحقيق هو مكمل لتسلسل معين في العينة).
4. يتم تحضين المجس مع الغشاء لربط مع تسلسل معين.
5. يتم غسل مجسات غير منضم.
6. يتم الكشف عن شظايا مهجنة بواسطة التصوير الذاتي.

النشاف الشمالية هو أداة هامة في الكشف والكمي من مرنا المهجنة، ودراسة تدهور الحمض النووي الريبي، وتقييم الحمض النووي الريبي نصف العمر، والكشف عن الربط الحمض النووي الريبي، ودراسة التعبير الجيني، الخ

الشكل 02: النشاف الشمالية

ما هو "النشاف الغربية"؟

النشاف الغربي هو طريقة للكشف عن بروتين معين من خليط البروتين عن طريق استخدام الأجسام المضادة المسمى. لذلك، يعرف أيضا لطخة غربية كما إمونوبلوت . وقد تم تقديم هذه التقنية من قبل توبين وآخرون في عام 1979، ويجري الآن بشكل روتيني في المختبرات لتحليل البروتين. الخطوات هي كما يلي.

1. يتم استخراج البروتينات من العينة
2. يتم فصل البروتينات عن طريق أحجامها باستخدام بولي أكريلاميد هلام الكهربائي
3. يتم نقل جزيئات منفصلة إلى غشاء بفدف أو غشاء نيتروسليلوز بواسطة إليكتروبوراتيون
4. يتم حظر الغشاء غير ملزمة ملزمة مع الأجسام المضادة
5. ملزمة البروتينات المحولة مع الأجسام المضادة الأولية (انزيم المسمى الأجسام المضادة).
6. يتم غسل الغشاء لإزالة الأجسام المضادة الأولية غير المرتبطة بشكل غير محدد
7. يتم الكشف عن الأجسام المضادة من خلال إضافة الركيزة والكشف عن راسب ملون شكلت

النشاف الغربي مفيد في الكشف عن الأجسام المضادة المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية في عينة مصل الإنسان. ويمكن أيضا أن تستخدم لطخة غربية كاختبار تأكيدي للعدوى التهاب الكبد B واختبار نهائي لمرض جنون البقر.

الشكل 03: النشاف الغربية

ما هو الفرق بين شمال وجنوب وغرب النشاف؟

- ديف المادة قبل منتصف الجدول>>

الشمالية مقابل جنوب مقابل الغربية النشاف
نوع جزيء الكشف
نورثرن بلوتينغ	النشاف الشمالية بالكشف عن تسلسل الحمض النووي الريبي محددة من عينة الحمض النووي الريبي.
جنوب النشاف	جنوب النشاف بالكشف عن تسلسل الحمض النووي محددة من عينة الحمض النووي.
الغربية النشاف	الغربية النشاف بالكشف عن بروتين معين من عينة البروتين.
نوع من هلام
نورثرن بلوتينغ	وهذا يستخدم أغاروس / الفورمالديهايد هلام.
جنوب النشاف	وهذا يستخدم هلام الاغاروز.
الغربية النشاف	وهذا يستخدم هلام بولي أكريلاميد.
طريقة النشاف
نورثرن بلوتينغ	هذا هو نقل الشعرية.
جنوب النشاف	هذا هو نقل الشعرية.
ويسترن بلوتينغ	هذا هو نقل كهربائي.
المجسات المستخدمة
نورثرن بلوتينغ	[كدنا] أو رنا تحقيقات المسمى إشعاعيا أو نونراداكتيفيلي.
جنوب النشاف	دنا تحقيقات وصفت إشعاعي أو غير راديكتيفيلي.
الغربية النشاف	يتم استخدام الأجسام المضادة الأولية كما تحقيقات.
نظام الكشف
نورثرن بلوتينغ	يتم ذلك باستخدام جهاز تصوير أوتوماتيكي، أو الكشف عن الضوء أو تغيير اللون.
جنوب النشاف	ويتم ذلك باستخدام أوتوراديوغراف، الكشف عن الضوء أو تغيير اللون.
ويسترن بلوتينغ	ويتم ذلك باستخدام الكشف عن الضوء أو تغيير اللون.

ملخص - نورثرن فس سوثرن فس ويسترن بلوتينغ

بلوتينغ هو تقنية خاصة وضعت لتحديد الحمض النووي أو الحمض النووي الريبي أو البروتين المحدد من العينات. هناك ثلاثة إجراءات منفصلة النشاف، وهي الشمالية والجنوبية والغربية، للكشف عن نوع معين من جزيء. تم تصميم تقنية النشاف الشمالية للكشف عن تسلسل الحمض النووي الريبي محددة من خليط من الحمض النووي الريبي. تقنية النشاف الجنوبية تمكن الكشف عن تسلسل الحمض النووي محددة من عينة الحمض النووي وتقنية النشاف الغربية وضعت لتحديد بروتين معين من خليط البروتين.

المراجع

1. جيبونز، جاناي. "لطخة غربية: بروتين نقل نظرة عامة. "مجلة أمريكا الشمالية للعلوم الطبية. مدكنو المنشورات والإعلام المحدودة، مارس 2014. ويب. 27 مارس 2017

2. براون، T. "الجنوبي النشاف. "البروتوكولات الحالية في علم المناعة. المكتبة الوطنية للطب، مايو 2001. ويب. 27 مارس 2017

3. انه، شان L. "لطخة الشمالية. "طرق في الأنزيمولوجيا. مكتبة الولايات المتحدة الوطنية للطب، 2013. ويب. 27 مارس 2017

إيماج كورتيسي:

1. "مخطط البقعة الشمالية" بواسطة RNA405 - العمل الخاص (المجال العام) عن طريق كومونس ويكيميديا ​​

2. "ويسترن بلوت 114A" بواسطة أمانثاباجدون - العمل الخاص (المجال العام) عبر كومونس ويكيميديا ​​