الفرق بين ماكسام جيلبرت وسانجر التسلسل

فارق المفاتيح - ماكسام جيلبرت فس سانجر سيكنسينغ

النيوكليوتيدات هي الوحدات الهيكلية الأساسية ولبنات البناء من الحمض النووي. ويتكون جزيء الحمض النووي من سلسلة بولينوكليوتيد. هناك أربعة نوكليوتيدات مختلفة وجدت في الحمض النووي. وتتكون هذه النيوكليوتيدات من أربع قواعد نيتروجينية مختلفة تسمى A (أدينين)، G (غوانين)، C (السيتوزين)، T (ثيمين). ترتيب النيوكليوتيدات في جزيء الحمض النووي له أهمية كبيرة لأنه يشفر المعلومات الوراثية الهامة لنمو الكائنات الحية والتنمية. يشير تسلسل الحمض النووي إلى العملية التي تحدد تسلسل النوكليوتيدات الدقيق للحمض النووي. هناك طرق مختلفة تسلسل الحمض النووي. تسلسل ماكسام جيلبرت وتسلسل الحمض النووي سانجر هي طريقتين من تسلسل الحمض النووي التي تنتمي إلى تسلسل الجيل الأول. يحدد إجراء التسلسل ماكسام جيلبرت تسلسل قاعدة من خلال تشريح كيميائيا شظايا الحمض النووي المسمى 5 'نهاية تفضيلي في كل من أربعة النيوكليوتيدات والهلام الكهربائي. الإجراء سانجر التسلسل يحدد تسلسل النوكليوتيدات عن طريق تجميع الحمض النووي واحد تقطعت بهم السبل باستخدام البلمرة دنا و ديديوكسينوكليوتيدس والهلام الكهربائي. هذا هو الفرق الرئيسي بين ماكسام جيلبرت و سانجر التسلسل.

المحتويات
1. نظرة عامة والفرق الرئيسي
2. ما هو ماكسام جيلبرت
3. ما هو سانجر التسلسل
4. جنبا إلى جنب المقارنة - ماكسام جيلبرت مقابل سانجر التسلسل
5. ملخص

ما هو التسلسل ماكسام جيلبرت؟

تسلسل ماكسام جيلبرت، المعروف أيضا باسم طريقة التسلسل الكيميائي ، وهي تقنية تم تطويرها لتحديد ترتيب النوكليوتيدات في الحمض النووي. وقد أدخلت هذه الطريقة من قبل والتر جيلبرت وألان ماكسام في عام 1976 وأصبحت شعبية لأنه يمكن أن يؤديها مباشرة مع الحمض النووي المنقى. أسلوب ماكسام جيلبرت ينتمي إلى الجيل الأول من تسلسل الحمض النووي، وكان أول طريقة التسلسل المستخدمة على نطاق واسع من قبل العلماء.

المبدأ الأساسي لهذه الطريقة يكمن في تقييد شظايا الحمض النووي المسمى نهاية في قواعد محددة من قبل المواد الكيميائية قاعدة محددة والظروف وفصل الشظايا المسمى بواسطة الكهربائي كما هو مبين في الشكل 01. يتم فصل الشظايا وفقا لأحجامها على هلام. منذ وصفت شظايا، تسلسل جزيء الحمض النووي يمكن استخلاص بسهولة.

تستخدم طريقة ماكسام جيلبرت مواد كيميائية محددة قاعدة لكسر الحمض النووي في قواعد محددة. يتم استخدام اثنين من المواد الكيميائية المشتركة اسمه كبريتات ثنائي ميثيل والهيدرازين الكيميائية للهجوم انتقائي البيورين وبيريميدينس، على التوالي.

يتم تنفيذ طريقة التسلسل ماكسام جيلبرت عبر عدة خطوات على النحو التالي.

  1. تنقية تسلسل الحمض النووي باستخدام إندونوكليسيس تقييد
  2. وضع علامات على نهايات شظايا الحمض النووي عن طريق إضافة الفوسفات المشعة
  3. تنقية شظايا المسمى من شظايا غير المسمى من قبل الكهربائي هلام
  4. الحمض النووي في أربعة أنابيب ومعالجة مع المواد الكيميائية محددة قاعدة بشكل منفصل
  5. الكهربائي من محتويات كل أنبوب على خطوط منفصلة على هلام وفصل جزء وفقا لطولها.
  6. الكشف عن الشظايا بواسطة التصوير الذاتي.

الشكل 01: تسلسل ماكسام جيلبرت

ما هو التسلسل سانجر؟

سانجر التسلسل هو طريقة التسلسل التي وضعها فريدريك سانجر وزملاؤه في عام 1977 لتحديد تسلسل قاعدة شظايا الحمض النووي معين. ومن المعروف أيضا باسم سلسلة تسلسل إنهاء أو طريقة ديديوكسي التسلسل. تعمل هذه الطريقة على مبدأ الانتقائية دمج ديديوكسينوكليوتيدس سلسلة (دنتبس) مثل دغب، دكب، داتب و دتب عن طريق الحمض النووي البلمرة خلال تخليق الحمض النووي واحد الذين تقطعت بهم السبل لإنهاء تشكيل حبلا. ديديوكسينوكلأوتيدس تفتقر 3 'مجموعات أوه لتشكيل السندات فوسفهوديستر مع النوكليوتيدات المجاورة. وبالتالي، يتوقف تشكيل حبلا مرة واحدة يتم دمج دنتب في حبلا تشكيل حديثا خلال التسلسل سانجر.

في هذه الطريقة، يتم تنفيذ أربعة تفاعلات توليف الحمض النووي منفصلة (ير) في أربعة أنابيب منفصلة مع نوع واحد من دنتب. كما يتم توفير متطلبات أخرى للأنابيب ل ير بما في ذلك الاشعال، دنتبس، بوليميراز طاق، شروط محددة، وما إلى ذلك يتم تنفيذ أربعة ردود فعل منفصلة في أربعة أنابيب مع أربعة مخاليط. بعد تفاعلات ير، شظايا الحمض النووي الناتجة هي الحرارة التشويه والتحريف وفصلها بالهلام الكهربائي. ثم يتم تصور شظايا باستخدام إما تسمية (المشعة أو الفلورسنت) التمهيدي أو دنتبس كما هو مبين في الشكل 02.

الشكل 02: تسلسل سانجر

ما هو الفرق بين ماكسام جيلبرت وسانجر التسلسل؟

>

ماكسام جيلبرت فس سانجر التسلسل

ماكسام جيلبرت التسلسل هو أول تقنية وضعت لتسلسل الحمض النووي. أدخلت طريقة سانجر التسلسل بعد طريقة التسلسل ماكسام جيلبرت.
الاستخدام
نادرا ما تستخدم هذه الطريقة. يستخدم تسلسل سانجر بشكل روتيني للتسلسل.
استخدام المواد الكيميائية الخطرة
ويستخدم المواد الكيميائية الخطرة. استخدام المواد الكيميائية الخطرة محدود بالمقارنة مع طريقة ماكسام جيلبرت.
وضع العلامات للكشف
تستخدم هذه الطريقة المشعة P 32 لوضع علامات على نهايات شظايا الحمض النووي. يستخدم تسلسل سانجر إشعاعي أو دنستبس فلورزنتلي المسمى.

ملخص - ماكسام جيلبرت فس سانجر سيكنسينغ

ماكسام جيلبرت وسانجر التسلسل هما نوعان من تقنيات تسلسل الحمض النووي القادمة تحت تسلسل الحمض النووي الجيل الأول.تسلسل ماكسام جيلبرت هو الطريقة الأولى التي أدخلت على تسلسل الحمض النووي في عام 1976، ويتم ذلك عن طريق كسر نهاية شظايا الحمض النووي المسمى من قبل المواد الكيميائية قاعدة محددة. وبالتالي، فإنه يعرف باسم التسلسل الكيميائي. وقد أدخلت طريقة سانجر التسلسل في عام 1977، ويستند إلى دنبتب ردود الفعل إنهاء سلسلة مدفوعة. سانجر طريقة التسلسل شعبية من طريقة ماكسام جيلبرت بسبب العديد من عيوب طريقة ماكسام جيلبرت مثل استهلاك الوقت المفرط، واستخدام المواد الكيميائية الخطرة، وما إلى ذلك هذا هو الفرق بين ماكسام جيلبرت وتسلسل سانجر.

المراجع:
1. ماكسام، أ. م، و والتر جيلبرت. "طريقة جديدة لتسلسل الحمض النووي. "وقائع الأكاديمية الوطنية للعلوم. علوم أكاد الوطنية، 9 ديسمبر 1976. ويب. 30 مارس 2017
2. هيذر، جيمس م.، وبنيامين سلسلة. "تسلسل التسلسل: تاريخ تسلسل الحمض النووي. "علم الجينوم. الصحافة الأكاديمية، يناير 2016. ويب. 30 مارس 2017
3. باريك، شاندرا شيخار، رافال سموزينسكي، و أندرزج تريتين. "تسلسل التكنولوجيات وتسلسل الجينوم. "مجلة علم الوراثة التطبيقية. سبرينجر-فيرلاغ، نوفمبر 2011. ويب. 30 مارس 2017

إيماج كورتيسي:
1. "تسلسل ماكسام جيلبرت" عدة مرات في ويكيبيديا الإنجليزية (سيسي بي 3. 0) عبر ويكومديا كومونس
2. "سانغر-سكنينغ" بي إستيفيزج - عمل خاص (سيسي بي-سا 3. 0) عبر ويكومديا كومونس